如何提高噬菌體展示文庫(kù)的庫(kù)容?

 噬菌體展示技術(shù)將基因型和表型統(tǒng)一于同一噬菌體顆粒，相較于傳統(tǒng)的抗體制備技術(shù)，提供了不經(jīng)免疫制備抗體的可能，可以解決因?yàn)槿蹩乖⒆陨砜乖?、具有毒性的抗原等抗體制備的困難。因此也是目前抗體庫(kù)制備中應(yīng)用十分廣泛的一項(xiàng)技術(shù)。

一個(gè)好的噬菌體抗體庫(kù)需要具備較大的容量和良好的多樣性，如果庫(kù)容量較小，則難以獲得高親和力的抗體。那么想要獲得較大庫(kù)容和多樣性豐富的噬菌體文庫(kù)，有哪些可以優(yōu)化的因素呢？
 

一、選擇高轉(zhuǎn)化效率的大腸桿菌（感受態(tài)細(xì)胞）

噬菌體文庫(kù)的庫(kù)容會(huì)受大腸桿菌轉(zhuǎn)化效率的限制，選擇高效率的電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞，能有效的增加噬菌體文庫(kù)的庫(kù)容，另外也可以通過(guò)增加轉(zhuǎn)化次數(shù)來(lái)累積庫(kù)容。在噬菌體展示文庫(kù)構(gòu)建過(guò)程中，使用比較多的感受態(tài)細(xì)胞有TG1、XL1-Blue、SS320等。

在進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)時(shí)，要想獲得高的轉(zhuǎn)化效率，質(zhì)粒/連接產(chǎn)物的純度、電轉(zhuǎn)的條件、質(zhì)粒/連接產(chǎn)物的加入量以及操作的規(guī)范性也是需要注意的地方。