多層囊泡 (MLV) 的制備

以下是用于制備脂質體的凍干（冷凍干燥）脂質混合物的方案的簡要概述：

1. 將脂質溶解在氯仿中。

2. 以適當的比例混合脂質。

3. 使用干燥氮氣流小心蒸發有機溶劑。

4. 將脂質混合物重新懸浮在環己烷中。如果混合物未全部溶解在環己烷中，則添加少量乙醇（環己烷體積的 1-2%）。不要使用過多的乙醇，因為過量的乙醇不會使溶液凍結。

5. 使用干冰冷凍環己烷溶液。

6. 快速將冷凍混合物置于高真空系統（凍干系統）上。一般來說，“室內真空"系統對于這個過程來說不夠強大。樣品應保持冷凍狀態直至全部干燥；如果樣品開始解凍，則可能是真空不夠強，或者存在太多乙醇。解凍的樣品不會產生白色粉末，并且可能會從小瓶中隆起或起泡。

7. 將樣品放在真空系統上 3-5 小時（取決于使用的環己烷量）或直到樣品全部干燥（從真空中取出時，小瓶摸起來或環己烷的氣味不應感覺冷）。注意：這會產生干燥的白色粉末，很容易懸浮在水中。另一種方法是使用適當的水性緩沖液重新懸浮通過蒸發氯仿而產生的脂質膜。

8. 將脂質混合物懸浮在水性緩沖液中（緩沖液溫度應高于脂質的相變溫度），并讓混合物在脂質的相變溫度以上水合 30-60 分鐘（偶爾渦旋）。該過程產生大的多層囊泡（LMV 或 MLV）。對于要包埋的水溶性化合物，遵循相同的方案，不同之處在于將化合物溶解在用于重構干脂質的水性緩沖液中，并且通過凝膠過濾除去外部化合物（未封裝的）。

參考

Frank Szoka, Jr. 和 Demetrios Papahadjopoulos，(1980)，“脂質囊泡（脂質體）的比較特性和制備方法"，Ann。生物物理學牧師。生物工程。，9：467-508。