如何檢測(cè)ATCC細(xì)胞增殖情況呢？

　　檢測(cè)DNA合成法是目前檢測(cè)ATCC細(xì)胞增殖準(zhǔn)確可靠的方法，常用的方法有：

　　1.3H-胸腺嘧啶核苷滲入法(3H-TdR)

　　胸腺嘧啶核苷(TdR)是DNA合成的前體物，處于S期的細(xì)胞不斷地?cái)z取TdR用以合成DNA。3H-TdR摻入法是將被放射性標(biāo)記的3H-TdR摻入DNA合成期的細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)3H-TdR摻入量的多少可客觀反映細(xì)胞復(fù)制DNA能力的大小，從而問接了解細(xì)胞增殖情況。通過檢測(cè)H放射活性即可反映DNA含量。

　　2.BrdU檢測(cè)法

　　BrdU中文全名為5-溴脫氧尿嘧啶核苷，為胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期)摻入，而后利用抗BrdU的抗體耦聯(lián)不同的酶，加入不同發(fā)光特性的底物，然后再通過比色法、化學(xué)發(fā)光檢測(cè)或熒光信號(hào)檢測(cè)底物強(qiáng)度等步驟，反映BrdU的摻入量。該方法不需要再和放射性物質(zhì)打交道。

　　3.EdU檢測(cè)法

　　BrdU雖然解決了接觸同位素的問題，但該方法需要變性DNA后才能與抗體結(jié)合，但這就破壞了DNA雙鏈結(jié)構(gòu)，對(duì)某些后續(xù)或同時(shí)進(jìn)行的試驗(yàn)，如其他染料的結(jié)合染色有影響。現(xiàn)在有一種新的檢測(cè)方法能避免這種情況的發(fā)生-EdU檢測(cè)。EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷)也是一種胸腺嘧啶核苷類似物，但其連有的炔羥基團(tuán)在天然化合物中很少見，在細(xì)胞增殖時(shí)能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中，基于EdU與染料的共軛反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析，可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比，更簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確。