ATCC細(xì)胞的初代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)說(shuō)明

　　ATCC細(xì)胞進(jìn)行初代培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)步驟如下：

　　1.剪切

　　把組織小塊（1cm³）置入小燒杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污，吸凈Hanks液，用眼科剪反復(fù)剪切成1mm³塊為止。

　　2.擺布

　　用彎頭吸管吸取若干小塊，置入培養(yǎng)瓶中；用吸管彎頭把組織小塊擺布在培養(yǎng)瓶底上，小塊相互距離以0.5cm為宜，每一25ml培養(yǎng)瓶底可擺布20-30塊。

　　3.輕輕翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，令瓶底向上。注意翻瓶時(shí)勿令組織小塊流動(dòng)，塞好瓶塞，置36.5℃溫箱2小時(shí)左右（勿超過(guò)4小時(shí)），使小塊微干涸。

　　4.培養(yǎng)

　　取出培養(yǎng)瓶并開(kāi)塞，保持46°斜持培養(yǎng)瓶（瓶底仍向上），向瓶底角部輕輕注入培養(yǎng)液小許，然后緩緩再把培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，讓培養(yǎng)液慢慢覆蓋附于瓶底上的ATCC細(xì)胞組織小塊（組織小塊附著尚不牢，注意不要把組織塊沖走）；置溫箱中靜止培養(yǎng)。待細(xì)胞從組織塊游出數(shù)量增多后，再補(bǔ)加培養(yǎng)液。